赭曲霉毒素A是一种具有肾毒性、肝毒性、免疫毒性甚至致癌性的次生代谢产物,广泛存在于谷物、中药材等农产品中。为了保障中药的安全性和有效性,精准检测赭曲霉毒素A至关重要。
本实验参照中国药典2025版征求意见稿方法,采用免疫亲和柱结合液相色谱串联荧光检测器(HPLC-FLD),建立了槟榔和黄芪中赭曲霉毒素A的检测方法。
1、实验方法
样品提取
取供试品粉末约3 g,置于均质瓶中,加入氯化钠3 g,精密加入70%甲醇60 mL,高速搅拌2 min,8000 r/min离心10 min,精密量取上清液5 mL,置50 mL量瓶中,用PBS缓冲液稀释至刻度,摇匀,8000 r/min离心15 min,上清液待净化。
样品净化
精密量取上清液20 mL,通过免疫亲和柱,流速3 mL/min,用聚山梨酯20 PBS缓冲液10 mL洗脱,弃去洗脱液,使空气进入柱子,再用水10 mL洗脱,弃去洗脱液,使空气进入柱子,将水挤出柱子,再用甲醇1.5 mL洗脱,收集洗脱液,置2 mL量瓶中,并用水稀释至刻度,摇匀,PTFE亲水滤膜滤过,取续滤液,即得。
色谱条件
色谱柱:Robussil C18,5 µm,4.6 × 250 mm
流动相A:2%乙酸水溶液
流动相B:乙腈
流动相比例:A:B = 45:55
柱温:40℃
进样量:20 µL
2、实验结果
槟榔中赭曲霉毒素A检测结果
采用免疫亲和柱处理槟榔中的赭曲霉毒素A,加标回收率在90% ~ 之间,RSD小于10%。实验结果表明,免疫亲和柱净化效果良好,能够满足检测要求。
槟榔加标回收实验结果(n=3)
黄芪中赭曲霉毒素A检测结果
采用免疫亲和柱处理黄芪中的赭曲霉毒素A,加标回收率在80% ~ 之间,RSD小于10%。实验结果表明,免疫亲和柱净化效果良好,能够满足检测要求。
黄芪加标回收实验结果(n=3)
3、产品优势与推荐
赭曲霉毒素A免疫亲和柱
采用免疫亲和柱处理黄芪中的赭曲霉毒素A,加标回收率在80% ~ 之间,RSD小于10%。实验结果表明,免疫亲和柱净化效果良好,能够满足检测要求。
订货号:HCM0750B
高选择性:能够特异性地结合赭曲霉毒素A,有效去除杂质干扰。
高回收率:在槟榔和黄芪样品中,回收率分别达到90% ~ 和80% ~ ,确保检测结果的准确性。
操作简便:净化过程简单,易于操作,适合实验室常规检测。
其他配套产品
甲醇中赭曲霉毒素A标准溶液
订货号:MSL035
规格:10 μg/mL, 1 mL
用途:为检测提供准确的定量标准
Robussil C18色谱柱
订货号:CSH952505
规格:5 µm,4.6 × 250 mm
用途:适用于高效液相色谱分析
样品瓶及瓶盖
订货号:MZ-V9W(样品瓶)、MZ-V9C(瓶盖)
规格:1.5 mL样品瓶,短螺纹透明带书写处,配套9 mm中心孔蓝盖,红色硅胶/米色PTFE隔垫
用途:确保样品存储和进样过程的稳定性
PTFE亲水滤膜
订货号:MZ081320
规格:单膜,13 mm,0.22 μm
用途:有效过滤样品中的颗粒杂质,保护色谱柱。
槟榔中赭曲霉毒素A分析质控样品
订货号:MRM2021
规格:30g/袋
用途:确保检测结果的准确性和可靠性
黄芪中赭曲霉毒素A分析质控样品
订货号:MRM2022
规格:30g/袋
用途:确保检测结果的准确性和可靠性
4、实验结论
本实验通过免疫亲和柱净化结合高效液相色谱荧光检测器,成功建立了槟榔和黄芪中赭曲霉毒素A的检测方法。实验结果表明,该方法具有高回收率、低变异系数,能够满足中药质量控制的检测要求。
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